Availability: Charakterisierung des Toll-like-Rezeptor-7-Agonisten SC1 für die Therapie eines murinen Lymphommodells

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Title:	Charakterisierung des Toll-like-Rezeptor-7-Agonisten SC1 für die Therapie eines murinen Lymphommodells
From:	vorgelegt von Michael Chalopuka
Person:	Chaloupka, Michael 1989- Verfasser aut
Main Author:	Chaloupka, Michael 1989- (Author)
Format:	Thesis Book
Language:	German
Published:	München 2017
Subjects:	Hochschulschrift
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adam_text	INHALTSVERZEICHNIS 1. EINLEITUNG........................................................................................................................1 1.1 DAS IMMUNSYSTEM....................................................................................................1 1.1.1 DAS ANGEBORENE IMMUNSYSTEM UND TOLL -//TEE-REZEPTOREN.....................................1 1.1.2 TOLL-//KE-REZEPTOR-7...............................................................................................2 1.1.3 TLR7-SIGNALKASKADE ............................................................................................. 3 1.2 TLR7-LIGANDEN IN DER TUMORTHERAPIE......................................................... 4 1.2.1 WIRKMECHANISMEN VON TLR7-AGONISTEN...............................................................5 1.3 FRAGESTELLUNG............................................................................................................8 2. MATERIAL UND METHODEN.............................................................................................. 10 2.1 GERAETE UND REAGENZIEN ......................................................................................... 10 2.1.1 TECHNISCHE GERAETE...............................................................................................10 2.1.2 REAGENZIEN, PUFFER UND CHEMIKALIEN .................................................................. 10 2.1.3 KITS......................................................................................................................12 2.1.4 MATERIALIEN FUER DIE ZELLKULTUR .............................................................................. 12 2.1.5 ZELLLINIEN..............................................................................................................13 2.1.6 ANTIKOERPER UND FARBSTOFFE FUER FACS UND LUMINEX..............................................13 2.1.9 TLR-LIGANDEN UND ZYTOKINE ............................................................................... 15 2.1.10 SOFTWARE.............................................................................................................15 2.2 ZELLKULTUR............................................................................................................. 15 2.2.1 ALLGEMEINE ZELLKULTURBEDINGUNGEN..................................................................... 15 2.2.2 BESTIMMUNG VON ZELLZAHL UND VITALITAET............................................................... 16 2.2.3 EINFRIEREN UND AUFTAUEN VON ZELLEN.................................................................... 16 2.2.4 KULTIVIERUNG VON TUMORZELLEN............................................................................. 16 2.3 MAEUSE.....................................................................................................................16 2.4 IMMUNOLOGISCHE METHODEN................................................................................... 17 2.4.1 LNTERLEUKIN-6 ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA) .............................. 17 2.4.2 MIKROSPHAEREN-BASIERTER LUMINEX-ASSAY.............................................................17 2.4.3 DURCHFLUSSZYTOMETRIE.......................................................................................... 17 2.4.4 TLR7-LUCIFERASE-ASSAY....................................................................................... 18 2.5. IN VITRO VERSUCHE...................................................................................................18 2.5.1 ISOLIERUNG MURINER SPLENOZYTEN .......................................................................... 18 2.5.2 IN VITRO STIMULATION MURINER SPLENOZYTEN MIT TLR7-LIGANDEN...........................18 2.5.3 ISOLIERUNG VON MURINEM KNOCHENMARK UND GENERIERUNG DENDRITISCHER ZELLEN .19 2.5.4 TACHYPHYLAXIE......................................................................................................19 2.6 IN VIVO VERSUCHE ............................ 20 2.6.1 IN VIVO ZYTOTOXIZITAETSNACHWEIS............................................................................ 20 2.6.2 RMA-S-TUMORMODELL............................................................... 20 2.7 STATISTISCHE ANALYSE................................................................................................21 3. ERGEBNISSE.................................................................................................................. 22 3.1 SC1 IST EIN TLR7-ABHAENGIGER AGONIST.................................................................... 22 3.1.1 SC1 AKTIVIERT TLR7 IN EINER REPORTERZELLLINIE ...... ............................................... 22 3.1.2 DIE STIMULATION MURINER SPLENOZYTEN MIT SC1 FUEHRT ZUR TLR7-VERMITTELTEN, DOSISABHAENGIGEN SEKRETION DES PROINFLAMMATORISCHEN IL-6 UND WEITERER PROINFLAMMATORISCHER FAKTOREN................................................................................... 22 3.2 SC1 IST WENIGER ANFAELLIG FUER EINEN TACHYPHYLAXIE-BEDINGTEN WIRKUNGSVERLUST ALS R848.............................................................................................................................25 3.3 DIE SYSTEMISCHE GABE VON SC1 FUEHRT UEBER EINE AKTIVIERUNG VON IMMUNZELLEN ZUR LYSE NK-ZELL-SENSITIVER ZELLEN..................................................................................... 26 3.3.1 SC1 INDUZIERT DIE LYSE VON SSA-MIKROGLOBULIN-DEFIZIENTEN SPLENOZYTEN UEBER NK- ZELLEN.................................................................................................................... 26 3.3.2 SC1 AKTIVIERT VERSCHIEDENE IMMUNZELLPOPULATIONEN IN VIVO ............................... 28 3.3.3 DIE BEHANDLUNG MIT SC1 FUEHRT ZUR HEILUNG VON MAEUSEN IN EINEM NK-ZELL- SENSITIVEN TUMORMODELL ............................ 29 4. DISKUSSION.................................................................................................................. 32 4.1 DIE STIMULATION VON IMMUNZELLEN MIT SC1 FUEHRT ZUR TLR7-ABHAENGIGEN SEKRETION EINES PROINFLAMMATORISCHEN ZYTOKINPROFILS ....................................................... 32 4.2 DIE ANWENDUNG VON SC1 HAT VORTEILE GEGENUEBER R848 HINSICHTLICH SEINES GERINGEREN TACHYPHYLAXIE-BEDINGTEN WIRKUNGSVERLUSTS ............................................. 34 4.3 DIE BEHANDLUNG MIT SGI FUEHRT ZUR AKTIVIERUNG DES IMMUNSYSTEMS UND INDUZIERT DIE NK-ZELL-VERMITTELTE LYSE MHC-L-DEFIZIENTER ZELLEN ............................................... 35 4.4 KLINISCHE VERWENDUNGSMOEGLICHKEITEN VON SC1................................................... 37 5. ZUSAMMENFASSUNG.......................................................................................................39 6. LITERATURVERZEICHNIS................................................... 40 7. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.............................................................................................. 54 PUBLIKATIONEN................................................................................................................... 57 DANKSAGUNG................................................................................................ 58 LEBENSLAUF.........................................................................................................................59
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